PCR (polimerāzes ķēdes reakcija) pārbaude ir galvenā tehnoloģija molekulārā diagnostikā. Tā iesaiņošanas un testēšanas procesu standartizācija tieši ietekmē rezultātu precizitāti un bioloģisko drošību. Šis raksts sniedz profesionālu perspektīvu par galvenajiem kvalitātes kontroles punktiem visā PCR testēšanas procesā.
Parauga saņemšana un pirmapstrāde ir pirmie procesa posmi. Laboratorijām stingri jāpārbauda parauga identificēšana, transporta apstākļi un uzglabāšanas laiks, lai nodrošinātu paraugu integritāti. Pēc saņemšanas paraugiem jābūt numurētiem un jāreģistrē bioloģiskās drošības skapī un jāiziet pirms - apstrādes procedūras, piemēram, lizēšana un nukleīnskābes ekstrakcija, pamatojoties uz testa veidu. Šajā posmā šajā posmā ir nepieciešama divu - personas verifikācijas sistēma, lai novērstu savstarpējo - piesārņojumu.
PCR reakcijas sistēmas sagatavošana jāveic tīrā solā. Operatoriem jāvalkā 3. līmeņa aizsardzības aprīkojums un jāizmanto nuklease - bezmaksas palīgmateriāli. Reaģenta sagatavošana ievēro principu "vienvirziena darbplūsma", pārejot no reaģenta sagatavošanas apgabala uz parauga apstrādes zonu un pēc tam uz pastiprināšanas zonu. Katrā reakcijas partijā jāiekļauj negatīvas kontroles, pozitīvas kontroles un iekšējās kontroles, lai uzraudzītu eksperimentālo derīgumu.
Amplifikācijas un pārbaudes fāzes laikā PCR instrumentam jābūt iepriekšam - kalibrētam un pārbaudītam temperatūras ciklošanas parametriem. Reakcijas procedūrā parasti ietilpst trīs soļi: denaturācija (94 - 95 grāds), atkvēlināšana (50–65 grādi) un pagarinājums (72 grāds). Ciklu skaits tiek koriģēts, pamatojoties uz noteikšanas mērķi. Reālā laika fluorescences PCR prasa arī uzraudzīt konkrētu kanālu fluorescences signāla slieksni.
Rezultātu analīze un ziņošana jāveic kvalificētiem tehniķiem. Neapstrādāti dati ir jāpārskata vismaz diviem profesionāļiem, lai apstiprinātu pastiprināšanas līknes morfoloģiju, CT vērtības ticamību un kvalitātes kontroles materiālu atbilstību standartiem. Galīgajā ziņojumā jāietver informācija par testa metodoloģiju, rezultātu interpretācijas pamats un testa ierobežojumu paziņojums.
Viss process stingri ievēro ISO 15189 un atbilstošās CDC specifikācijas. Lai nodrošinātu PCR testēšanas uzticamību un izsekojamību, tiek ieviesta trīskārša garantijas vides uzraudzības sistēma, aprīkojuma uzturēšana un personāla apmācība.