Polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) eksperimentos reaģentu un paraugu iepakojums tieši ietekmē eksperimentālo rezultātu precizitāti un drošību. Standarta PCR iepakojuma procedūrām stingri jāievēro sterilitātes, piesārņojuma novēršanas un skaidras marķēšanas principi. Īpašas procedūras ir aprakstītas turpmāk.
1. Sagatavošana
Pirms turpināt, nēsājiet laboratorijas mēteli, cimdus un masku, lai nodrošinātu tīru vidi (ieteicams tīrs sols vai bioloģiskās drošības skapis). Pārbaudiet, vai visi palīgmateriāli (piemēram, centrifūgas caurules, PCR plāksnes) nav DNASE/RNāzes piesārņojuma un izmantojiet autoklāvus vai enzīmu - bezmaksas sterilizatorus. Reaģenti (piemēram, gruntējumi, šablona DNS, fermenti utt.) Jābūt alikvotos atsevišķos flakonos, lai izvairītos no atkārtotiem iesaldēšanas - atkausēšanas cikliem.
2. alikvotēšana un marķēšana
Alikvotie reaģenti: izmantojiet pipeti, lai pēc eksperimentālām vajadzībām izdalītu galveno maisījumu, gruntējumus utt. Izmantojiet vienreizējās lietošanas pipetes padomus, lai izvairītos no krustojuma - piesārņojuma.
Marķēšanas standarti: Visiem konteineriem jābūt skaidri marķētiem ar nosaukumu, koncentrāciju, datumu un operatora numuru. Ūdensnecaurlaidīgas etiķetes vai tieša gravēšana ir ieteicama, lai novērstu nesalasāmus marķējumus.
3. Iepakojums un blīvēšana
Pēc alikvošanas nekavējoties pievelciet centrifūgas caurules vāciņus vai aizzīmogojiet PCR plāksnes (izmantojot siltumu - plēves blīvēšanas vai specializētu līmi), lai novērstu noplūdi. Garai - Termiņa glabāšanai ieteicams ievietot iepakojumu noslēgtā maisiņā un pievienot sausu vidi, piemēram, silikagela lodītes), lai uzturētu sausu vidi.
4. Uzglabāšana un pārvadāšana
Pēc iepakojuma PCR reaģenti jāuzglabā atsevišķi pie - 20 grādu (gara - termins) vai 4 grādu (īstermiņa), lai izvairītos no temperatūras svārstībām. Transports jāveic izolētā traukā, kas piepildīts ar spilvenu materiālu, lai novērstu šoku un noplūdi. Biohazardiskiem paraugiem ir nepieciešama atbilstība bioloģiskās drošības iesaiņojuma prasībām saskaņā ar ANO 3373 vai attiecīgiem noteikumiem.
Standartizētas PCR iepakojuma procedūras ir būtiskas eksperimentālai uzticamībai. Stingra aseptiska kontrole un skaidra marķēšana var efektīvi samazināt piesārņojuma riskus un nodrošināt datu precizitāti.
